猴PBMC、血清、血浆

【空白 食蟹猴外周血PBMC】

外周血单个核细胞（PBMC）是白细胞（WBC）的一个子集，白细胞是机体免疫系统对抗疾病的组成部分。PBMC由淋巴细胞（T细胞、B细胞和NK细胞）和单核细胞组成，通过密度梯度离心从外周全血中分离。PBMC被广泛应用于药物发现/开发、分析验证/开发和其他免疫学应用中。

【空白 食蟹猴血清、血浆】

1、来自健康空白未给过药的食蟹猴；

2、雌性食蟹猴（F）和雄性食蟹猴（M）数量可根据客户选择；

3、血清使用分离胶采血管采集，血样正常，无溶血；血清为新鲜采集，未经过解冻

【空白 恒河猴外周血PBMC】

外周血单个核细胞（PBMC）是白细胞（WBC）的一个子集，白细胞是机体免疫系统对抗疾病的组成部分。PBMC由淋巴细胞（T细胞、B细胞和NK细胞）和单核细胞组成，通过密度梯度离心从外周全血中分离。PBMC被广泛应用于药物发现/开发、分析验证/开发和其他免疫学应用中。

【空白 恒河猴血清、血浆】

1、来自健康空白未给过药的恒河猴；

2、雌性恒河猴（F）和雄性恒河猴（M）数量可根据客户选择；

3、血清使用分离胶采血管采集，血样正常，无溶血；血清为新鲜采集，未经过解冻

什么是食蟹猴？

食蟹猴也称长尾猕猴，是生物医学研究中常用的非人类灵长类动物（NHP）。成年食蟹猴体长约为40-47厘米，尾长为50-60厘米。雄性食蟹猴体重5-7千克，雌性食蟹猴体重约为3-4千克。因为喜欢在退潮后到海边觅食螃蟹及贝类，故名食蟹猕猴。一般来说，食蟹猴的寿命为25~30年。19~31个月大的食蟹猴被认为是幼年猴，32~44个月的食蟹猴子被认为是青春期（未性成熟）。食蟹猴性成熟期雌性为4岁，雄性为6岁。

为什么使用食蟹猴？

食蟹猴由于与人类有90-93%的遗传相似性，可表现出人类常见的与年龄相关的疾病，如心血管疾病、阿尔茨海默病、骨质流失、膝骨关节炎、肥胖、糖尿病和糖尿病并发症。食蟹猴也被广泛用作同种异体或异种移植的动物模型。因而研究人员认为食蟹猴是研究疾病病理学、疫苗开发、免疫学和心脏病学等基础研究的理想模型。根据FDA指南，食蟹猴也用于制药行业药物研发的毒理学和疗效研究。

但在食蟹猴体内进行实验，需要综合考虑药物的机理，以最终确定是否在食蟹猴上进行。比如由于食蟹猴缺乏艾滋病进展，因而导致艾滋病毒建模失败。如开发抗CD28激动剂抗体，在这里，食蟹猴就是比较差的模型，因为他们的CD4+T细胞不表达CD28，因此，毒理学研究中使用的高剂量抗体对食蟹猴是没有影响的，然而，当将抗体注入人体后会导致细胞因子释放综合征，常常会造成致命副作用。

但通过对食蟹猴样本（如外周单个核细胞PBMC或全血）进行体外研究，研究人员或许能够对后续的人体体内研究是否有益有所了解。此外，监管机构，包括FDA和EMA建议甚至要求需要这方面的研究数据以评估跨物种反应。

食蟹猴样本(PBMC,Serum,Plasma)的体外应用

食蟹猴PBMC可用于研究治疗抗体的Fc介导功能，如抗体依赖性细胞毒性实验（ADCC）。对不同人类抗体亚型在不同细胞类型中的疗效的研究表明，人和食蟹猴ADCC的效应细胞相似。因此，可以在食蟹猴的PBMC上验证ADCC相关实验。同时食蟹猴的PBMC也可以用作ADCC测定的靶细胞。Rituximab单抗能够对表达CD20的食蟹猴B细胞执行ADCC效应，所以在食蟹猴的体内研究中使用利妥昔单抗时会表现出B细胞耗竭。所以在进行这些检测时必须使用适当的试剂，如对照抗体，以确保观察到的细胞毒性是抗体/靶向抗原驱动，而不是由一些与人类效应细胞无关的分子驱动。

虽然食蟹猴B细胞增殖及B细胞抗体分泌等功能与人比较相似。但是,人和食蟹猴T细胞增殖及细胞因子分泌存在明显差异,人相对食蟹猴而言T细胞的免疫应答功能更为强烈,因此动物数据中T细胞毒性评价外推至人时需要慎重考虑。根据中检院的一篇文献，其通过三种方式来验证人与食蟹猴T细胞和B细胞功能的比较。

(1)单抗诱导细胞因子释放试验:人和食蟹猴PBMC细胞与ANC28.1（Anti-CD28 Mouse Mab）共孵育2h,24h,48h,然后进行TNF-α,IFN-γ的ELSIA检测。

(2)T/B细胞增殖试验:收集人和食蟹猴外周血PBMC细胞,给予不同浓度植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS),孵育3d后,cck-8检测细胞增值率。

(3)收集人和食蟹猴外周血PBMC细胞,给于流感疫苗、抑制剂(抗CD20单抗)或细胞培养液。孵育6d后采用ELISPOT检测抗体的分泌。

结果

(1)单抗诱导细胞因子释放试验:随ANC28.1作用时间的延长,人PBMC细胞释放的TNF-α及INF-γ逐渐增加。然而,食蟹猴PBMC细胞无TNF-α及INF-γ的释放（因为食蟹猴CD4+上不表达CD28）。

(2)T/B细胞增殖试验:人和食蟹猴外周血PBMC细胞给于PHA后细胞数目明显增加,然而人PBMC细胞增殖幅度明显高于食蟹猴。但是在不同浓度LPS刺激下,人和食蟹猴外周血中PBMC增殖趋势非常相似。

(3)B细胞抗体形成功能测定:人和食蟹猴外周血PBMC细胞给于流感疫苗刺激后,其分泌相应抗体的细胞数目明显高于阴性对照组。给于抗CD20单抗后,食蟹猴抑制组分泌抗体的细胞数目明显减低。在相同处理条件下,人和食蟹猴分泌抗体的细胞数目增长幅度类似。。

来自食蟹猴的血清可用于补体依赖性细胞毒性（CDC）测定。CDC 所需的组分蛋白存在于食蟹猴血清中，可用于表达靶抗原的人类靶细胞的CDC检测。因此，人类治疗性抗体可以招募食蟹猴补体蛋白，以促进靶细胞的溶解。

食蟹猴的血清和血浆也经常用于设置基线和生成各种检测的浓度参考范围（如细胞因子释放测量）。同时食蟹猴的血清或血浆也可用作各种检测的试剂。如ELISA、ELISPOT和WB都是免疫测定，需要初始阻断以防止非特异性结合，而食蟹猴血清可用于实现这种功能。